注冊干貨|什么情況下需要補充申請?

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發表時間:2021-01-21 17:18作者:精誠CRO注冊部


圖片



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依據:藥品注冊管理辦法(27號令)


圖片第十一條   變更原藥品注冊批準證明文件及其附件所載明的事項或者內容的,申請人應當按照規定,參照相關技術指導原則,對藥品變更進行充分研究和驗證,充分評估變更可能對藥品安全性、有效性和質量可控性的影響,按照變更程序提出補充申請、備案或者報告。


第二十九條   藥物臨床試驗期間,發生藥物臨床試驗方案變更、非臨床或者藥學的變化或者有新發現的,申辦者應當按照規定,參照相關技術指導原則,充分評估對受試者安全的影響。


第三十一條   藥物臨床試驗被責令暫停后,申辦者擬繼續開展藥物臨床試驗的,應當在完成整改后提出恢復藥物臨床試驗的補充申請,經審查同意后方可繼續開展藥物臨床試驗。藥物臨床試驗暫停時間滿三年且未申請并獲準恢復藥物臨床試驗的,該藥物臨床試驗許可自行失效 。


第六十六條   對附條件批準的藥品,持有人應當在藥品上市后采取相應的風險管理措施,并在規定期限內按照要求完成藥物臨床試驗等相關研究,以補充申請方式申報。                                                                                                                                                




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案例:臨床期間發生的變更怎么做可比性研究?

            ---單克隆抗體在臨床試驗 II 期之后發生變更


圖片 背景:

  1. I、II 期臨床用的是雜交瘤(Hybridoma)細胞株,產量低;II期結束后,變更為CHO細胞株,細胞表達量提高10倍;相應地,主細胞庫、工作細胞庫都變了;

  2. 工藝變更;生產規模變大;生產地點變化;

  3. 分析方法變更,采用靈敏度更高、分辨率更高的方法;如下表,


IND階段
工藝驗證階段
SDS-PAGE
毛細管電泳(CE
分子排阻高效液相色譜法 單分離柱(SEC-HPLC,   single column)
SEC-HPLC, dual column
離子交換高效液相(CEX), 等電聚焦電泳(IEF gel)
毛細管等電聚焦 (cIEF
增加了肽圖(Peptide Map
生物學活性檢測:ELISA & 基于細胞的方法
基于細胞的方法
表征的分析方法
變化


圖片 解釋變更前后的差異

使用變更后樣品進行SEC-HPLC 單分離柱試驗時,在主峰和雙聚體之間,有個峰分離度不好;所以開發了雙分離柱試驗,該峰分離度就好了。見下圖:

圖片

SEC-HPLC單分離柱、雙分離柱圖


采用SEC-HPLC 雙分離柱,對變更前、變更后樣品進行檢驗,發現了兩者的差異。變更后的樣品多了雜峰,見下圖。把該雜峰分離出來,進行鑒定。

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SEC-HPLC雙分離柱的變更前后樣品分析

采用CEX-HPLC進行純度分析,發現了更大的差異。

圖片

CEX-HPLC檢驗


采用唾液酸酶切后,檢驗的單克隆抗體是相同的。因為早期使用的雜交瘤細胞株,與CHO相比,產品唾液酸含量非常高。

該單抗可能存在27種異構體。

N端谷氨酰胺(Q)環化形成焦谷氨酸鹽(pE),造成單抗電荷異質性;

C端賴氨酸(K)不均一,正常情況下可以被羧肽酶切除。然而,這種切除是不完全的,通常會導致一條重鏈或兩條重鏈上還有賴氨酸殘基修飾。而當細胞內的羧肽酶水平較高時,兩條重鏈上則沒有賴氨酸殘基修飾。這便是C末端賴氨酸不均一性,也稱為k0、k1、k2。

唾液酸引起的三種電荷可能性。

對于離子交換高效液相(CEX-HPLC),流動相的pH選擇非常關鍵,所以應開發合適pH的離子交換高效液相方法。并且,繼續分析有無二硫鍵錯配的異構體。


圖片 可比性研究

表1 可比性研究分類分級

分類
包括的內容
A:分析學檢測
批放行質量控制(含量、純度、鑒別等)
額外的分析學特征
加速試驗的降解產物
工藝相關雜質
B:生物學特征
生物學活性
Fcγ受體、FcRn 、 C1q 受體結合力
ADCC、CDC
BIAcore或其它結合試驗
C:動物PK和PK-PD試驗
嚙齒類的PK
靈長類的PK-PD
D:臨床PK可比性
變更前、變更后的產品在人體的直接可比性
E:臨床有效性研究
有效性、是否有新的不良事件、免疫原性變化的確認
臨床試驗(可能不需要頭對頭的比較)

表2 在關鍵臨床研究過程中或之后,發生的工藝變更及擬定可比性研究

工藝變更
分類a
細胞培養變化,表征沒有變化
如果單抗沒有細胞殺傷作用(cell killing),進行A+Bb
如果單抗有細胞殺傷作用(mAb depletes cells),進行A+B
回收率(Recovery)變化,表征沒有變化
如果單抗沒有細胞殺傷作用(cell killing),進行A+Bb
如果單抗有細胞殺傷作用(mAb depletes cells),進行A+B
細胞培養或回收率變化,電荷分布變化
進行A+B+C
細胞培養變化,Fc 糖基化分布變化
如果單抗沒有細胞殺傷作用(cell killing),進行A+Bb
如果單抗有細胞殺傷作用(mAb depletes cells),進行A+B
如果變化程度大,進行A + B + C
從凍干制劑變為液體制劑,新的輔料
A+B+C+D
從凍干制劑變為液體制劑,質量標準變化,新增了小量其它形態(increased   minor forms)
A+B+C+E
活性成分濃度變化導致的制劑變化
A+B+C+D
從原始主細胞庫(MCB)衍生的新細胞株
A+B+C+D
重新轉化、或新宿主細胞衍生的新細胞株
A+B+C+E

a分類AB C D E的定義見表1;

b分類B包括的僅是放行需要的活性檢測試驗;

表3 單抗工藝變更的案例,以及證明可比性進行的PK-PD研究a

工藝變更,
以及發生時間
觀察到的理化性質
非臨床PK–PD研究
臨床可比性研究
單抗細胞株變化,
臨床試驗 I 期
主峰輕微增加,堿性峰輕微降低
b
單抗細胞株變化(從雜交瘤到CHO),
臨床 I 期
N/A
猴PK可比性研究(n=12/組),結果符合可比性
患者分組進行平行PK研究(n≤10/組),結果符合可比性標準
單抗細胞株變化,
臨床 III 期前
N/A
大鼠PK可比性研究(n=6/組)c,結果顯示兩個產品沒有差別;未進行正式生物等效性分析
單抗細胞株變化,
臨床 III 期前
堿性異構體從4%增加到6-10%;酸性異構體從25%降低到19%
大鼠PK可比性研究(n=12/組)d , AUC 0-14結果符合等效性標準
臨床 III 期用原材料(material)與后期不同
N/A
大鼠PK可比性研究(n=20/組)c,AUC 0-11d結果符合等效性標準
從臨床 III 期到工藝驗證批次,單抗滴度增加
在Fc 區的 N 糖基化位點,Man5形態從2-4%增加到4-7%
小鼠PK可比性研究顯示,Fc糖基化對清除(clearance)沒有影響
人體PK研究(n=37-46/組 , 平行設計 , 單劑量) , AUC0-、AUC 0-last、AUC   max符合等效性標準
抗炎癥治療,正在接受FDA審評
N/A
兩個制劑在食蟹猴的PK可比性研究(n=6/組)
健康受試者,單劑量,PK可比性研究

a N/A,not applicable,不適用;

b進行CDC、ADCC和受體結合ELISA試驗;

c進行活性試驗;

d進行FcgRs、FcRn、ADCC試驗;


該案例在美國FDA的申報:變更前的3-5批與變更后的3-5批,進行頭對頭(head to head)的可比性研究。試驗結果滿足可接受標準,且沒有發現新物質產生,僅在動物水平進行橋接研究,未進行人體橋接研究,直接進入臨床Ⅲ期試驗關鍵臨床研究。

該案例在歐洲EMA的申報:更換細胞株就是新產品,不接受可比性研究。